氯离子对氧化亚铁硫杆菌和氧化亚铁钩端微螺菌活性的影响.pdf

’4 2 ‘ 有色金属 冶炼部分 h t t p ／／y s y l ．b g r i m m ．c n 2 0 1 5 年第1 期 d o i 1 0 ．3 9 6 9 ／j ．i s s n ．1 0 0 7 7 5 4 5 ．2 0 1 5 ．0 1 ．0 l1 氯离子对氧化亚铁硫杆菌和氧化亚铁 钩端微螺菌活性的影响 郭勤，韩文艳，李江，刘亚洁，史维浚，郑福存 东华理工大学省部共建核资源与环境教育部重点实验室，南昌3 3 0 0 1 3 摘要采用连续稀释法分别从江西和广东某铀矿生物冶金现场筛选得到两株亚铁氧化菌。1 6 sr D N A 鉴 定结果表明，细菌分别为氧化亚铁硫杆菌 A c i d i m i c r 0 6 i “m 知r r o 。。i f Ⅱ”s 和氧化亚铁钩端微螺菌 k 争一 r o s 户i r i z 2 “，” r 一钟i ￡“，” 。在氯离子浓度在lg ／I 。以内，对细菌亚铁氧化活性基本没有影响；1 ～2g ／L 铁氧化活性有所降低，但是细菌通过调节依然能够适应并维持比较高的活性；氯离子浓度大于2g ／I 。后 亚铁氧化活性急速下降，当氯离子浓度大于3g ／I ．后细菌生长受到抑制，亚铁氧化活性很低。 关键词氧化亚铁硫杆菌；氧化亚铁钩端螺旋菌；氯离子；亚铁氧化活性 中图分类号T I ．2 1 2 ．1 12文献标志码A文章编号1 0 0 7 7 5 4 5 2 0 1 5 o 卜0 0 4 2 一0 4 E f f e c to fC h l o r i d eI o n so nA c t i V i t yo fA c f d f m Z c r D 易i 醒珑F P ，．r D D x Z d 口挖sa n d L P p f D s p Z ，．f Z Z 比mF e r r Z p 庇f Z M mF e r r D “s G U Q i n ，H A NW e n y a n ，L IJ i a n g ，L I UY a j i e ，S H IW e i j u n ，Z H E N GF u c u n K e yl ，a b o r a t o r yo fN u c l e a rR e s o u r c e sa n dE n v i r o n m e n t E C I T ，M i n i s t r yo fE d u c a t i o n ， E a s tC h i n aI n s t i t u t eo fT e c h n o l o g y ，N a n c h a n g3 3 0 0 1 3 ，C h l n a A b s t r a c t T w oa c i d i c b a c i l l u ss t r a i n sw e r ei s o l a t e df r o ms a m p l e so fu r a n i u mb i o l o g i c a lh e a pl e a c h i n go r ei n J i a n g x ia n dG u a n g d o n gp r o v i n c eb ys u c c e s s i v ed i l u t i n gm e t h o d ．1 6 sr R N Ag e n es e q u e n c ea n a l y s i sc o n f i r m s t h a to n eb a c t e r i ai sA c i d i ，n i c r 0 6 i “m 厂已r r o o z i d 口竹s a n dt h eo t h e ri s L e 夕￡o s 夕i r i Z f “m，P r r i p 矗i ￡M 研． C o n c e n t 姐t i o no fc h l o r i n ei o no fl g ／Lb e l o wh a sn oe f f e c to nf e r r o x i d a s ea c t i v i t y ．A c t i v i t yw e a k e n sw i t h c o n c e n t r a t i o no fc h l o r i d ei o ni n1 ～2g ／I 。，b u tp r o p e ra d j u s t m e n tc a ne n a b l eb a c t e r i u mt oa d a p ta n d m a i n t a i na c c e p t a b l ea c t i v i t y ． H o w e v e r ， w h e nc h l o r i d ei o nc o n c e n t r a t i o ni s2 g ／La b o v e ， f e r r o x i d a s e a c t i v i t yw e a k e n sr a p i d l ya n dg r o w t ho fb a c t e r i ai s e V e ni n h i b i t e dw i t hl o w e rf e r r o x i d a s ea c t i v i t yw h e n c o n c e n t r a t i o no fc h l o r i d ei o ni s3g ／La b o v e ． K e yw o r d s A c i d i 7 7 2 i f ，一0 6 i “打z ，P r r D o ．z i d n 砣s ；L P 户￡o s p i r i Z Z 聪m ／0 r r i 户 i Z “m ；c h l o r i d e ； f e r r o u s o x i d a t i o nc a p a c i t y 浸矿微生物主要有氧化亚铁硫杆菌 A f 澎；撇i c r 拍i 谢m r r o o T i d 鲫s 、氧化亚铁钩端微螺菌 L e p z 0 5 夕i r i Z Z “搬扣r 矗砖i z “删 和氧化硫硫杆菌 丁讫i o 妇一 c 洲“sf i o o z i d 删s 等。矿石浸出过程中溶解出多 种离子，会对冶金细菌的生长活性产生一定的影响。 对于金属离子C u 抖、P b ”、M n 2 ’等前人5 1 做过比 较细致的研究，同样，阴离子也会对细菌亚铁氧化活 性产生很大的影响。吴学玲等嘲的研究表明，在相 收稿日期2 0 1 4 一0 8 2 5 基金项目国家高技术研究发展计划 8 6 3 计划 项目 2 0 1 2 A A 0 6 1 5 0 4 ；科技部国际合作项目 2 0 1 1 D F R 6 0 8 3 0 作者简介郭勤 1 9 8 9 一 ，男，江西南昌人，硕士研究生；通信作者李江 1 9 6 6 一 ，男，山东济南人，教授． 万方数据 2 0 1 5 年第1 期 有色金属 冶炼部分 h t t p ／／y s y l ．b g r i m m ．c n 4 3 同浓度下，对细菌亚铁氧化活性影响力的顺序为 N O 。一 C l 一 S 0 。2 ．。在现实生产中，N O 。一的使用 很少，主要是C l 一和S 0 。2 - 。在铀矿浸出生产实践 中，细菌在S O 。2 一介质培养基中活性较高，而培养基 含有C l ～会对细菌的生长活性产生显著的影响。在 铀的吸附、淋洗、甚至除钙酸化[ 7 。钉过程中需要使用 氯化物，导致整个浸出体系中有C l 的存在。铀矿 浸出过程中起氧化作用的菌株分别是氧化亚铁硫杆 菌和氧化亚铁钩端螺旋菌。作者在实践中发现，广 东铀矿矿石硫化亚铁含量比较低，气温较高，微生物 浸铀的优势菌株为氧化亚铁钩端螺旋菌，而江西铀 矿矿石硫化亚铁含量比较高，堆浸现场温度变化比 较大，其优势菌群为氧化亚铁硫杆菌。本文采用极 限稀释法从江西和广东某铀矿堆浸场矿石中分离得 到这两类优势菌群的纯菌株，并采用1 6 sr D N A 测 序鉴定分离后的纯菌，最后研究了这两株菌在不同 浓度氯离子条件下，对二价铁的氧化速率，并就氯离 子影响这两类型菌的机理进行初步分析。 1 材料与方法 1 ．1 仪器设备 B T 2 2 4 S 电子天平，D Y Y 一5 稳压稳流电泳仪， B i o p r i n t0 0 8 凝胶成像系统，H H 一4 数显恒温水浴 锅，S w C J 一1 F D 单人单面净化工作台，z F 一7 A 手提 紫外检测灯，3 2 1 一Sp H 计，Z H w Y 一2 1 1 C 恒温培养 振荡器，f r e s c o 离心机，P C R 仪，N i c h i p e tE x 移液 器，U V 1 6 0 0 紫外／可见分光光度计，D N P 一9 0 8 2 B S I I I 电热恒温培养箱，Y x 2 8 0 A 手提式不锈钢蒸汽消 毒器。 1 ．2 试剂以及培养基 总D N A 提取试剂盒F a s t D N As p i nk i tf o r l s o i l ；离心柱型琼脂糖凝胶D N A 回收试剂盒 D P 2 0 9 ，d N T P ；琼脂糖；T a q 酶；三羟甲基氨基甲烷 T r i s ；十六烷基三甲溴化化铵 C T A B ；蛋白酶 K ；R N a s e A ；十二烷基硫酸钠 S D S ；蛋白酶K ；乙 二胺四乙酸 E D T A ；果胶；E X - T a q 和L A T a q D N A 聚合酶。 9 K 培养基[ 1 钓定溶至1O o om L ，用浓硫酸调 p H 至1 ．8 ，1 2 1 ℃高温湿热灭菌。 5g ／LF e 2 溶液称取2 5 0gF e S 0 4 7 H 2 0 溶 于蒸馏水，定溶至10 0 0m L ，调p H 为1 ．8 ，过滤灭 菌，4 ℃储藏备用，使用时取1 0m L 溶液。 T E 缓冲液l om m o l ／LT r i s C l ，1m m o l ／L E D T A ，p H8 ．0 。 1 ．3 试验方法 1 ．3 ．1 菌株的富集与分离 富集取1 0g 矿石于9 0m L 无菌9 K 培养基中 二价铁浓度5g ／L 在3 0 ℃、1 2 0r ／m i n 恒温震荡 培养。每隔4h 分析二价铁和三价铁，当二价铁氧 化率达到9 0 ％以上时第一代富集完成。将第一次 富集物静止放置一段时间后取1 0m L 上清液再次 转接到9 0m L 的9 K 培养基中 二价铁浓度5g ／L 在3 0 ℃、1 6 0r ／m i n 恒温培养，当二价铁氧化率达到 9 0 ％以上后，细菌富集完成。 分离采用极限稀释法分离菌株，每个样品取 1 5 支无菌试管，每支试管内装9m L 含3g ／L 左右 二价铁的无菌9 K 培养基。在无菌环境中取1m L 富集好的菌液到第一支试管中，摇匀后用新移液枪 头取1m L 到第二支试管中，如此依次稀释到第1 4 支试管，最后一支加入1m L 无菌水作为空白对照。 在3 0 ℃恒温培养箱中斜面放置培养6 ～7d ，观察颜 色，以获得纯菌。 1 ．3 ．2 菌株的鉴定 采用分析1 6 sR D N A 序列并对比N C B I 数据库 美国生物技术中心基因组数据库 鉴定分离后的目 的菌株。 收集菌体之后用T E 缓冲液调整p H 为中性； 采用总D N A 提取试剂盒提取总D N A ，试验步骤按 试剂盒说明书操作。 选用以下通用引物 1 3 8 7 R 57 一A G A G T T T G A r C M T G G C T C A G 一37 2 7 f 57 一G G G C G G W G T G T A C A A G G C 一37 以总D N A 为模板进行1 6 sr D N AP C R 扩增， P C R 扩增反应体系为1 0 L o a db u f f e r2 ．o 肛L 、 d N T Pm i x 2 ．5m m o l ／L 2 ．o “L 、T a q 酶 5U ／“L O ．2 肚L 、1 3 8 7 R 2 0 肚m o l ／L 0 ．5 肚L 、2 7 f 2 0 肚m o l ／ L o ．5 弘L 、模板D N A2 肛L 、d d H 2 01 2 ．8 肛I ⋯总体 积2 0 肚L 。 P C R 反应参数[ 1 6 ] 9 5 ℃预热处理5m i n ；9 4 ℃ 变性4 5s ，5 0 ℃退火4 5s ，7 2 ℃延伸9 0s ，3 0 个循 环；最终7 2 ℃充分延伸1 0m i n 。取3 扯LP C R 产物 进行1 ％琼脂糖凝胶电泳检测P C R 产物的大小及 纯度。P C R 产物纯化应用的是切胶纯化法，将全部 扩增产物加人1 “L1 0 l o a d d e rb u f f e r ，并在干净的 1 T A E 电泳液中，采用o ．8 ％琼脂糖凝胶电泳 4 0m i n 后，在3 6 0n m 波长的紫外光照射下，对发出 荧光的部分进行切胶，利用离心柱型琼脂糖凝胶 D N A 回收试剂盒D P 2 0 9 纯化D N A ，纯化步骤按试 万方数据 4 4 有色金属 冶炼部分 h t t p ／／y s y l ．b g r i m m ．c n 2 0 1 5 年第l 期 剂盒说明书操作。基因测序分析纯化后P C R 产物 送给上海生物工程有限公司测序分析。数据分析 测序结果在N C B I 数据库中进行比对，根据比对结 果确定菌株种类。 1 ．4 氯离子耐受试验 配置二价铁含量为5 0g ／I 。的高浓度硫酸亚铁 和氯化亚铁溶液 p H ～1 ．8 ，采用过滤除菌。保证 总铁一直为5g ／I 。左右，调节培养基中加入的硫酸 亚铁和氯化亚铁的比例来调节培养液中氯离子含 量。通过分析氯化亚铁的摩尔量来确定对应的氯离 子浓度。细菌按5 ％接种量接种，培养条件为 3 0 ℃、1 6 0r ／m i n 。根据生长情况分析监测培养液 中的F e 纠和F e 卜浓度。每组做一对平行，编号为 A 1 1 至A 1 1 1 、 A 2 1 至A 2 一1 1 ，以及 I 。1 1 至 L 1 1 1 、 I 。2 1 至L 2 一1 1 。试验结果如表1 所示。 表l 培养初始数据 T a b I e1I n i t i a lc u l t u r ed a t a 编号丽 1O 2 O ．8 3 31 ．2 4 41 ．6 6 51 ．8 0 62 ．0 7 72 ．4 9 83 ．1 8 94 ．7 0 1 05 ．8 0 1 16 ．6 3 氯含量 O 1 ．1 1 1 ．3 8 1 ．8 0 1 ．9 0 2 ．0 7 2 ．6 3 3 ．4 5 4 ．5 6 5 ．5 3 6 ．5 0 总铁含量 5 ．6 7 5 ．8 9 5 ．8 9 5 ．8 9 5 ．7 8 5 ．5 6 5 ．7 8 5 ．5 6 5 ．4 5 5 ．6 7 5 ．3 4 氯含量 O O ．6 9 1 ．2 4 1 ．3 8 1 ．4 8 1 ．8 0 2 ．2 l 3 ．1 8 4 ．1 5 4 ．8 4 5 ．3 9 氯含量 O O ．9 7 1 ．2 4 1 ．3 8 l _ 5 2 1 _ 8 0 1 ．9 0 3 ．1 8 4 ．1 5 4 ．8 4 5 ．3 9 2试验结果 2 ．1 菌株鉴定情况 分离后菌株1 6 sr D N A 经P C R 扩增纯化后电 泳图谱见图1 H 表示回收纯化产物，1 、2 分别代表 A 菌株和I 。菌株 。 图l纯化后两株菌的1 6 sr D N AP C R 扩增产物 纯化后电泳图谱 F i g ．1E l e c t r o p h o r e s i so ft w os t r a i n s 1 6 sr D N AP C Rp r o d u c t s 从图1 可以看出，P C R 产物经过纯化之后目的 片段与预期相符合，大小为13 0 0b p 左右；经过纯 化后去除了引物二聚体和其他杂质条带，可用于后 续的基因序列测定。 1 6 sr D N A 纯化产物基因测序后比对N C B I 的 结果如下A 菌株与一株氧化亚铁硫杆菌 A c i d i 一 如i o 施f 洲“5 r ，．i u o r 伽ss S 3 相似度达到了9 9 ％， L 菌株与一株氧化亚铁钩端螺旋菌 L P p ￡o s p i r i z z “m 知r r i 户 i z “mM L 0 4 相似度为9 2 ％，由此可认为A 菌株为氧化亚铁硫杆菌，L 菌株为氧化亚铁钩端螺 旋菌。 2 ．2不同氯离子浓度条件下亚铁氧化速率 不同氯离子浓度条件下，菌株的亚铁氧化速率 见图2 。 由图2 可见，氯离子对细菌的影响比较大。氧 化亚铁硫杆菌A 1 、A 2 在氯离子浓度小于1g ／L 时 的活性基本不变，细菌能够正常生长；当氯离子浓度 在1 ～2g ／L 时，其氧化亚铁活性有一定程度的下 降，但是细菌通过代谢调节作用依然能使得氧化活 性维持在较高水平；当氯离子浓度大于2g ／L 时，其 氧化亚铁活性几乎呈直线下降趋势，氯离子浓度大 于3g ／L 后，细菌几乎不再生长。而氧化亚铁钩端 量一 含一曲∞弘卯他蛎他帖蝎弱船铁一豇u{量u{}豇}量豇}量 总一 滢一 o，o，；o o o o o制一6鸲卵弘盯蛎弘蛎蛎弘孙 铁一 豇量豇}文}量曩曩曩 总一 毒黧薰鬻泌 万方数据 2 0 1 5 年第1 期有色金属 冶炼部分 h t t p ／／y s y l ．b g r i m m ．c n 4 5 幽 芒 幂 誊 斟 图2 不同氯离子条件下亚铁的氧化速率 F i g ．2 o x i d a t i o nr a t eo ff e r r O u s i r o nu n d e r d i f f e r e n tc h l O r i d ei o nc o n c e n t r a t i o n 微螺菌L 1 、L 2 的氯离子耐受性不如氧化亚铁硫杆 菌，在1g ／L 以内其氧化活性就呈现缓慢下降趋势， 大于1 ．5g ／I 。后就呈现直线下降，当氯离子大于2 g ／L 时，细菌受到抑制几乎不再生长。 3 结果分析与讨论 氯离子是生命活动必不可少的离子，大肠杆菌 能在1 0g ／LN a C I 的培养基中正常生长，相当于氯 离子含量为6g ／L 。本试验显示，在酸性条件下，氧 化亚铁硫杆菌和氧化亚铁钩端微螺菌在3g ／L 氯离 子条件下几乎不能生长。因为在酸性条件下，氯离 子和氢离子结合产生的H C l 可能能够直接作用于 细菌细胞膜，破坏细胞的稳定性[ 1 ⋯。在氯离子浓度 小于2g ／L 时，冶金微生物对氯离子有一定的耐受 性。研究结果表明[ 18 | ，氧化亚铁硫杆菌和氧化亚铁 钩端微螺菌对于其他离子的耐受性存在3 种机制 一是通过控制细胞膜表面离子通道蛋白的开启和关 闭来保持细胞内部离子浓度稳定；二是细胞内存在 一种离子泵蛋白，以消耗能源为代价将细胞内过量 的离子主动排出细胞外；三是细胞通过利用某些代 谢产物特异性地螯合过量的离子，将螯合物在细胞 内部形成微泡包裹起来，减轻对细胞的毒害。 在相同氯离子浓度下氧化亚铁硫杆菌亚铁氧化 活性优于氧化亚铁钩端微螺菌的生物调节机理还需 要进一步深入研究，可能与以下几方面有关1 细胞 膜的通透性；2 生物代谢途径的多样性，3 氯离子通 道蛋白以及离子调节蛋白。细菌亚铁氧化活性还与 培养条件和菌群本身活性有关，在最适宜的培养条 件下细菌亚铁氧化活性最强，培养条件越接近其最 适生长环境，细菌对于氯离子的耐受性越高。 本试验在室内恒温震荡培养器中培养，细菌生 长条件控制比较容易。但在实际生产中，由于温度， p H 等因素的控制比较困难，以及其他离子的相互 作用，细菌对于氯离子的耐受以及亚铁氧化活性会 产生偏移。细菌能适应多变的环境，在极端环境中， 细菌易发生突变，能产生氯离子抗性菌株，可以通过 诱导突变和驯化获得氯离子耐性更强的菌株。 4结论 1 氯离子对分离并鉴定的氧化亚铁硫杆菌 A c 谢砌i c r 0 6 i 越m 一，．，．o o z i d n 行s 和氧化亚铁钩端微 螺菌 L P p f o s p i ，．洲“研知r 厂i 户 i z M m 毒性比较大。 在氯离子浓度低于1g ／L 时，细菌活性几乎没有变 化，在1 ～2g ／L 范围内，经历一个稳定之后，亚铁氧 化活性迅速下降，当氯离子大于3g ／L 后，细菌被抑 制。几乎不生长。 2 在相同培养条件下氧化亚铁钩端微螺菌的氯 离子耐受性不如氧化亚铁硫杆菌，当氯离子浓度在 1g ／L 以内时，其氧化活性就呈现缓慢下降趋势，大 于1 ．5g ／L 后就呈直线下降，而大于2g ／L 后细菌 就受到抑制几乎不再生长。 参考文献 [ 1 ] 张成桂，张倩，王晶，等．阴离子对嗜酸氧化亚铁硫杆菌 生长和硫氧化活性的影响[ J ] ．中国有色金属学报， 2 0 0 9 ，1 2 6 2 2 3 7 2 2 4 2 ． [ 2 ] 刘奋武，高诗颖，王敏，等．镁离子对氧化亚铁硫杆菌生 物合成次生铁矿物的影响[ J ] ．中国环境科学，2 0 1 4 ，3 4 3 7 1 3 7 1 9 ． [ 3 ] 晏铭．氧化亚铁硫杆菌对P b 的耐受及浸出机理研究 [ D ] ．长沙湖南大学，2 0 0 8 ． [ 4 ] 李斗．氧化亚铁硫杆菌浸出铜矿尾矿重金属技术研究 [ D ] ．重庆重庆大学，2 0 1 1 ． [ 5 ] 历丽．隐藏嗜酸菌对嗜酸氧化亚铁硫杆菌A s 抗 性基因表达及浸矿作用的影响研究[ D ] ．长沙中南大 学，2 0 l O ． [ 6 ] 吴学玲，蒋莹，邱冠周，等．A f 谢i 施i o 妇c 删“s r r o o z i d n n s 菌株的分离及阴离子对其亚铁氧化活性的影响 [ J ] ．中国有色金属学报，2 0 0 8 ，1 8 2 3 4 9 3 5 5 ． [ 7 ] 文冬林，赵志斌，孙占学，等．某碱性铀矿盐酸除碳酸钙 对比试验[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 4 3 4 3 8 ． [ 8 ] 文冬林，孙占学．黄铁矿筑堆方式对微生物浸铀的影响 [ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 1 2 7 2 9 ． [ 9 ] 赵志斌，李江，孙占学，等．铀矿渣拌酸熟化酸度对比试 验[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 3 3 2 3 4 ． 下转第5 3 页 万方数据 2 0 1 5 年第1 期 有色金属 冶炼部分 h t t p ／／y s y l ．b g r i m m ．c n 5 3 [ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 4 7 8 一l o ． [ 1 7 ] 袁铁锤，陶政修，周科朝，等．提高含铟锌精矿中锌铟回 收率的方法[ J ] ．中南大学学报自然科学版，2 0 0 6 ，3 7 5 8 7 4 8 7 7 ． [ 1 8 ] 沈丽娟，吴克明，袁芳沁，等．锌冶炼过程中铟的富集与 回收技术研究进展[ J ] ．矿产综合利用，2 0 1 2 4 3 6 ． 上接第4 5 页 [ 1 0 ] 赵志斌，文冬林，孙占学，等．某铀矿石微生物柱浸翻柱 对比试验[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 5 3 1 3 4 ． [ 1 1 ] 黄军溶，李江，郭勤，等．低品位钛铀矿矿渣的微生物间 歇喷淋浸出工艺[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 1 0 4 2 4 4 ． [ 1 2 ] 陈剑朝，刘思维，陈功新，等．生物堆浸后期清水洗堆对 浸铀的影响[ j ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 4 3 3 4 3 6 ． [ 1 3 ] 焦学然，孙占学，刘思维，等．酸度及酸化介质对铀矿石 微生物浸出酸化的影响[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ， 2 0 1 4 4 3 3 3 7 ． [ 1 4 ] 周义朋，沈照理，何江涛，等．某砂岩型铀矿床矿石微生 物浸出试验[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 4 1 0 5 4 5 6 ． [ 1 5 ] 王有团，李广悦，刘玉龙，等．J x 嗜酸异养菌与氧化亚 铁硫杆菌联合浸铀的研究[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ， 2 0 1 0 2 4 2 4 5 ． [ 1 6 ] 何友文．一株嗜酸真菌的分离鉴定及其两种苷酶的酶 学性质[ D ] ．南昌南昌大学，2 0 1 1 ． [ 1 7 ] 强维亚，冯虎元，陈拓安，等．塑料制品光热分解主要产 物氯化氢对田间大豆伤害机理的初步研究[ J ] ．兰州大 学学报自然科学版，2 0 0 1 ，3 7 4 8 0 一8 4 ． [ 1 8 ] C a m i l aS a I a z a r ，M a ur i c i oA c o s t a l ，P e d r oG a l l e g u i l l o s ， e ta 1 ． A n a l y s i so fg e n ee x p r e s s i o ni nr e s p o n s et oc o p p e r s t r e s si nA c i d 打 i 0 6 口c i Z Z “s ，0 r r o o z i d 口“ ss t r a i nD 2 ，i s o l a t e df r o ma c o p p e rb i o l e a c h i n go p e r a t i o n [ J ] ．A d v a n c e d M a t er i a l sR e s e a r c h 。2 0 1 3 。8 2 5 1 5 7 一1 6 1 _ 上接第4 9 页 [ 1 3 ] 王欣，杨大锦，彭金辉，等．微波加热配碳还原分解铁酸 锌的工艺及机理研究[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 5 卜4 ． [ 1 4 ] 黄岩，梁杰，刘利军，等．耗散结构理论在微波还原焙烧 中的应用[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 1 1 2 1 4 ． [ 1 5 ] 梁佰战，陈肖虎，冯鹤，等．高硫铝土矿微波脱硫溶出试 验研究[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 1 3 2 3 2 6 ． [ 1 6 ] 张琳叶，黎铉海，孙勇，等．含富铟铁酸锌锌浸渣中铟的 微波强化酸浸[ J ] ．金属矿山，2 0 1 4 3 1 6 1 1 6 4 ． [ 1 7 ] 李健．张利波，彭金辉，等．响应曲面优化微波干燥铅渣 的工艺研究[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 2 1 2 5 7 ． [ 1 8 ] 王一雍，金辉．微波加热预处理一水硬铝石矿的工艺研 究[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 0 2 2 7 3 0 ． [ 1 9 ] 赵杰，张一敏，黄晶，等．含助浸剂对石煤酸浸提钒的影 响[ J ] ．金属矿山，2 0 1 3 1 9 0 一9 3 ． [ 2 0 ] 王非，张一敏，黄晶，等．氟离子促进石煤提钒浸出过程 的热力学研究[ J ] ．有色金属 冶炼部分 ，2 0 1 3 9 4 卜4 4 ． [ 2 1 ] 杨晓，张一敏，刘涛，等．含氟助浸剂对石煤提钒酸浸动 力学的影响[ J ] ．化学工程，2 0 1 3 ，4 1 5 5 9 6 3 ． 万方数据