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紫外线诱变获得耐极低 “ 的氧化亚铁硫杆菌突变株 刘亚洁， 李江， 陈功新， 刘艳 （东华理工学院土木与环境工程系， 江西省抚州市， ） 摘要 一株自某金矿分离纯化而得到的最适 “ , * ，3 4 ， “ AB C 8 D ，3 4 56 7 （E ; 7 F G H ; G C I J K 7 L J F C H ; G 7 K ; ; F ， 7 M G N 7 4 M G G O G ; C I* ; P N C K C Q， O R N C O， D ， N 7） 8 7 K M G F 7 C I “ 7 F 7 G ; L I F C H7T LC I C K LC F ;S G NC G 8 H O H “ F F C O M N 7 M U ; ; G F ; 7 G ; LU QO K G F 7 J C K ; G F F 7 L 7 G C ’/H O G 7 G M G F 7 M C U G 7 ; L7 I G ; F 7 M ; F ; M C I L F ; P G C 7 K I K G F 7 G C S N P NC G H O H “ M 7 F C O L ’ ; D 8 G F ; H ; K QP C L G C C I “ ’ ’V ; 7 S N K ; G M M G 7 U K ; 7 I G ; F , G H ; M C P O K 7 G P O K G O F ’* N ; P C H 7 F M C C IH C F 8 N C K C Q7 L N Q M C K C QC I G N ; C F 7 K M G F 7 7 LH O G 7 G M G F 7 L P 7 G ; M G N 7 G G N ;H O G 7 G M G F 7 M 7 T L C I J 7 F 8 ; G QC I “ ） 。 矿石培养基 将粒度在 0 0 6 6的混合金 矿矿石 （主要成份 ’ * 0 4 , 、 “ * , 0 , 、9 2 0 , 、 9 , 0 , ） 按固液比 酸化至; 0 ， 0 3 1 5下高压蒸汽灭菌 6 A B， 备 用。 定向筛选培养基 2 矿石培养基C 2 0 。 革兰氏染色及鞭毛染色用染液 ［ 0 、 , D条件下 振荡富集分离， 再经筛选、 固体培养纯化而得到菌株 “ E 。将该菌株在; 0 、 起始二价铁浓度2 0 - ／7 条件下矿石培养基中转代数次， 至平均二价铁氧化 速率 0 2 -／7F。以对数期的“ E 作为出发菌 株。 0 0 紫外诱变 ） 紫外照射 选择 2 G紫外灯， 将三组盛有出发菌液 6 7 的直径 0 。立即置于, D、 * J ／6 A B振荡培养箱 避光培养。培养过程中定时监测 ; ， 若升高则用浓 “ *调节， 使其始终维持在 0 左右。 待I 代中二价铁氧化近完全时， 分别取三组 照射时间中发育最快者各接种2瓶继代培养 （I 代） ； 同法至I K代， 获得氧化活性稳定的诱变菌株。 0 0 , 出发菌和诱变菌鉴定 分别通过革兰氏染色和鞭毛染色、 8 L2 型 / M 6 ; , “型梅特勒 Q / 5酸度计测定； 细菌密度利用P S T / 1 J TP W ; J N N软件 （美国） 在 / M 6 ; 2 显微镜油镜下活体计数。 试验结果及讨论 “ 诱变条件的确定 本次研究中， 诱变前出发菌的细菌总数一定 （O 0 X K个 ／ 6 7） ， 固定所选紫外灯功率及照射距 离， 因此诱变条件的确定即是照射时间的确定。 0 0 紫外照射时间的选择 三价铁具有强的紫外吸收性。一般诱变均先将 菌液制成无铁菌悬液， 再进行紫外照射。为了简化 操作， 我们对总铁浓度为 2 - ／7的出发菌菌液 （三价 铁浓度*2 -／7） ， 采用长时间照射 （分别为 2、 和 2 6 A B） ， 以达到较高的致死率。结果表明 照射 2 6 A B致死率最高， 为O 0 后菌密度比较 “ 8 0 ’ 3 ,2 3 4 / 3 - , / * / 1’ 5 9 ，9 8* - 69 存活细菌密度最低； 接种 “ 后， 三种照射时间下细 菌密度差异不大。 和 代时， 三种照射时间下 的初始细菌密度接近； 接种 “ 后， * “ “ * 7 ; “ * , a - - U , 8 E2 F8 ，A Q K F M Q ’ F Q - E- TY 6 Q - 8 G Q ’ K T 2 M M - - P Q U 8 E K 8 E U. 2 J F - K J Q M Q ’ ,T 2 M M - - P Q U 8 E KD , J Q G 8 F Q - E KT - Ma 2 E 2 M 8 \ F Q - E- TL G Q U Q E 2A M 8 Q E 8 ］北京 高等教育出版 社， 4 / 4 4 ［* ］ 黄秀犁微生物学 ［］北京 高等教育出版社， * * * /* 有色金属 （冶炼部分） 3年/期 万方数据
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